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小鼠原代细胞

简要描述:

小鼠原代细胞细胞特性:1、细胞活力原代取材活力≥90产品复苏率≥60培养两天就能清晰看到轴突与树突,培养时间可长达13-16天。

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小鼠原代细胞

消化时注意把握消化时间,消化不够会导致吹打细胞时造成损伤,一般消化时间是2-3分钟,但以镜检时大部分细胞缩回球形为准,一般2次即可将细胞吹打下来,消化不够进行细胞吹打易损伤细胞。细胞系的冻存液配方:90%FBS+10%DMSO,贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。

细胞数     1×10^6个

规格        复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)

培养基      90%高糖DMEM+10%FBS

生长条件    95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度

存储条件    50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮

详细说明    详见说明书

传代情况    PN3

理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养小鼠原代细胞,实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成年个体的组织容易培养,分化程度低的组织比分化高的容易培养,肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理,尽快培养,因故不能马上培养时,可将组织块切成黄豆般大的小块,置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌,同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌,为减少污染可用抗菌素处理。

正在培养中的应每隔一定时间观察一次,观察的内容包括细胞是否生长良好,形态是否正常,有无污染,培养基的PH是否太酸或太碱(由酚红指示剂指示),此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。

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