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IL-6试剂盒检验原理

   IL-6试剂盒检验原理
  IL-6试剂盒【预期用途】仅供科研运用,定量检测血清、血浆、细胞培育上清液中大鼠白细胞介素6(IL-6)的浓度。
  IL-6试剂盒【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)。
  在预包被抗大鼠白细胞介素6(IL-6)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,参与大鼠白细胞介素6(IL-6)校准品和待测样本,再参与另一株HRP标识表记标帜的抗大鼠白细胞介素6(IL-6)抗体(酶标抗体),经过温育与充沛洗濯,去除未结合的组分,在微孔板固相外表构成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
  加底物A和B,底物在HRP催化下,发生蓝色产物,在终止液(2M硫酸)作用下,zui终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中大鼠白细胞介素6(IL-6)的浓度正相关。
  拟合校准品曲线,可以计算出样本中大鼠白细胞介素6(IL-6)的浓度。
  测定步骤:
  使用前将所有试剂和样本平衡至室温。推荐所有的样本、标准和对照测定双份。
  1.如前所示,准备所有的试剂和工作标准品。
  2.取下多余的微量培养板条,放回装有干燥剂的锡箔袋中,重新密封。
  3.每孔加入100ul Assay Diluent RD1W。
  4.每孔依次加入100ul标准品、样本和对照。用橡皮条密封。室温孵化2小时。记录测定标准和样本的分布。
  5.吸弃孔内液体,每孔400ul洗涤液,充分洗涤后完全去除液体。在干净的纸上拍干。反复洗涤4次。
  6.每孔加入200ul IL-6 Conjugate。用新的橡皮膏条密封。室温温浴2小时。
  7.重复步骤5。

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