在细胞培养技术中,相比传代细胞的而言,原代细胞的获得就显得复杂的多。而细胞分离方法中,一些诀窍和经验都可以产生意料不到的技术效果,这也是原代细胞分离方法可性的原因之一。由于原代细胞本身是已知细胞,因此大多不具备新颖性,出于保护的角度,转而保护细胞的分离方法是常规的策略,但需要注意的是,原代细胞分离方法中一些例外是不予授权的。
原代细胞:是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。这里的组织主要指:组织器官、外周血及胚胎等。
小鼠原代细胞培养:由于原代细胞生长缓慢,繁殖一定的代数停止生长(一般10代以内)。所以一般认为:培养的原代的第1和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
由于原代细胞生物学特性未发生很大改变,zui接近和反映体内生长特性,因此是:
(1)研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的工具;
(2)更好实现医疗的肿瘤诊治模式,实现个体化用药的目的。
将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶/胶原酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。主要包括取材——分离——培养等3部分;