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如何缩小ELISA试剂盒的实验误差

如何缩小ELISA试剂盒的实验误差

ELISA试剂盒查验技师应具有从事实验室操作的基本素质和实践经验。
能娴熟操作实验仪器、器械,具有一定总结和剖析疑问的才华,对实验中出现的意外情况能及时妥善处理。
怎么减小ELISA实验中的过失呢?要从天然要素(试剂安稳性、准确率、仪器精密度)和人为要素(操作者)两个方面下手:
运用校对过的微量移液器,打扫天然过失。移液器准确与否对定量查看尤为首要。
值得改进的本地,重复实验判定树立后才华改进,比如洗板次数的掌握等。
加样要准确、迅速。化学理论标明,生成物的量与反应物的量成正有关。
评估试剂的实用性。
试剂的安稳与否,对准确率的凹凸到头首要。
在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品重复比照实验,判定试剂符合恳求后方可运用。
操作前仔细阅读说明书。
严厉按照说明书恳求进行规范化操作。
ELISA试剂盒不一样批号的试剂不可混用。
加样不准确,酶生成物的量不能判定,直接影响显色效果。
显色的深浅及A值的测定与参与显色剂和中止液的量有关,所以加样应慎重。
恳求在一定时间内加样完毕的实验,如果加样缓慢,便出现过失,而且试剂长时间显露在外,特别室温过高时,保存期会缩短甚至失效。
显色时间过短,参与中止液反应中止后,底物联络物的量过少,易出现假阴性。
超越显色恳求时间后显色,应判为假阳性,这或许与试剂自身有关。
洗板不彻底,酶联络物本底显色会出现假阳性。
洗刷液要新鲜,现用现配,陈旧的洗刷液会出现本底增高现象,也或许出现假阳性。
严控反应时间。
反应时间过长,酶失活;反应时间过短,酶联络物不能与血清中的微生物抗原抗体充分联络,生成物构造懈怠不健壮,简略洗掉,都或许构成假阴性。
严厉掌握显色时间。
加显色剂后当即显色,不可报阳性,这或许是本底显色的效果。
ELISA试剂盒留心试剂保存期,过保存期的试剂不能运用。

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