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细胞划痕实验

细胞划痕实验
材料:
6孔板
marker笔
直尺
20微升枪头(灭菌)
无血清培养基
PBS
准备:
所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)
流程:
1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2、在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3、第二天用枪头比着直尺,尽量垂直于背后的横线划痕,枪头要垂直,不要倾斜。
4、用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,加入无血清培养基。
5、放入37℃5%CO2培养箱培养。按0、6、12、24小时取样,拍照。
 

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