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ELISA试剂盒和固相抗结合的机会

ELISA试剂盒和固相抗结合的机会

看完我们为您分析的ELISA试剂盒相信大家对它们也有了进一步的了解,如果还有其他的问题可以登录我们公司的咨询我们的工作人员,我们将竭诚为您解答。在正式展开实验之前,首先要了解的是理论知识。而理论与实践都是不可缺少的,今日我们为您说说理论与实践的关系。
已包被抗原或抗体的固相载体在低温并且干燥的条件下,一般可以保存6个月,而有些不完整的试盒,仅供应包被用抗原或抗体,检测人员需自行包被。固相载体和包被过程:
在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。可作ELISA试剂盒中载体的材料很多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性,加之它的价格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。
在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。ELISA试剂盒抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育,有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。
加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
从理论来说,ELISA试剂盒温育采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达顶峰。

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