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ELISA试剂盒抗体反应使抗原固相化

ELISA试剂盒抗体反应使抗原固相化

ELISA试剂盒因此含杂质较多的抗原也可选用捕获包被法,试验的特异性、敏感性均由此得以改善,重复性亦佳。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附联络的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的效果于。可将聚苯乙烯板先经紫外线照射(例如30W紫外灯,75cm照射12小时),以增加其吸附功能。例如,在检查抗DNA抗体时,需用DNA作为包被抗原,ELISA试剂盒而广泛的固相载体一般不能直接与核酸联络。换言之,包被就是抗原或抗体联络到固相载体表面的进程。当抗原决定簇存在于或邻近于疏水区域时,抗原与固相载体的直接吸附可使抗原决定簇不能充分露出,在这种情况下,直接包被效果不佳,可以选用直接的捕获包被法,即先将关于该抗原的特异抗体作预包被,这今后通过抗原。也可用亲和素生物素体系作直接包被,即用亲和素先包被载体,然后参与生物素化的DNA,这种包被方法均匀、结实,已扩展应用于各种抗原物质的定量测定。
ELISA试剂盒的基本原理有三条:
(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分彼此吸附,并坚持其免疫学活性;
(2)抗原或抗体可通过共价键与酶联接形成酶联络物,ELISA试剂盒而此种酶联络物仍能坚持其免疫学和酶学活性;
(3)ELISA试剂盒酶联络物与相应抗原或抗体联络后,可依据参与底物的颜色反应来判定是不是有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显现试验效果。法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所导致的盛行症、寄生虫病及非盛行症等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,ELISA试剂盒依据现已运用的效果,认为法具有活络、特异、简略、快速、安稳及易于自动化操作等特征。不只适用于临床标本的检查,而且因为一天以内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清盛行病学调查。

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