技术文章
首页 > 技术文章 > 试剂盒的常见背景问题解析

试剂盒的常见背景问题解析

试剂盒的常见背景问题解析

zui常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种关闭液廉价、安稳,在去掉洗刷过程中的一些非特异上很有用。但它们只在存在时起作用,由于很简单被洗掉。因而一切洗刷液中也有必要添加关闭液。请勿运用高浓度(正常浓度为0.01-0.1%),它会下降特异,发作假阴性。另一个挑选是运用蛋白和非离子型去污剂这两种关闭液,后者可帮忙洗刷过程中的关闭。
关闭更要害
关闭液的作用是让不相关的蛋白占有微孔板中潜在的位点。这就下降了可发作信号的抗体非特异的机会。您当然也期望抗体只与意图蛋白吧。假如您的布景过高,置疑关闭不充分,那么您能够测验运用更高浓度的关闭液,或恰当延伸关闭时刻。
假如您一向被布景疑问所困惑,那么或许您该花些时刻来优化关闭液。这也许需求时刻,但也是值得的。目前主要有两种类型的关闭液:蛋白和非离子型去污剂。您运用的类型须取决于多个要素,包含微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和检查试剂。好的关闭液应下降非特异性,但它不应当与抗原、抗体或检查试剂发作相互作用。
洗刷很主要
洗刷过程看似很无聊,本来很主要,由于假如未的资料(如非特异的抗体或检查试剂)残留在微孔板中,那么它会添加布景噪音。如有必要,可添加洗刷液中的盐浓度,这会阻挠非特异反应。假如布景过高,而您置疑洗刷不行时,能够测验添加洗刷次数。
抗体浓度须优化
咱们通常会follow师兄师姐留下来的操作过程,但是假如试剂稍有不同,则也许需求优化抗体的量。记住,非特异的抗体会添加布景。为了避免这一点,切勿运用过多的一抗或二抗。
检查试剂要适当
ELISA试验的原理好像很简单,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗刷和关闭。但是,即使是平铺直叙的洗刷和关闭,假如做得不太好,也有也许毁了全部试验。在试验结束时,咱们是否能取得有意义的信息,这在很大程度上取决于成果的信噪比。布景噪音会影响您对成果的判别。怎么下降ELISA的布景,下面有一些tips。 

文章资讯

  • 新闻资讯
  • 技术文章
    • 联系我们

      邮箱:shzeysw@163.com
    • 地址:上海市松江区国家经济开发区北松公路5629号聚科生物松江园区
    • 联系人:赵琼

    公司(www.shzysw.cn)提供:骨代谢试剂盒,小鼠白介素试剂盒,内分泌试剂盒说明书,检测试剂盒说明书,人白介素ELISA试剂盒说明书

    Copyright © 2016 All Rights Reserved 网站地图 技术支持:环保在线  备案号:沪ICP备16043273号-1  管理登陆

    分享到: